Phenytoin (DFH), is an anticonvulsant widely used for the treatment of different types of seizures.(1) Therapeutic monitoring (TDM) is required for DFH due to its narrow therapeutic range and nonlinear pharmacokinetics, among other characteristics. Monitoring is frequently done on plasma or serum (total drug) through immunological methods. DFH can also be monitored in saliva, which shows a good correlation with plasma. The concentration of DFH in saliva reflects the concentration of free drug and due to the simplicity in its collection, it leads to a less stressful process for the patient. The aim of this study was to validate the immunological method of kinetic interaction of microparticles in solution (KIMS) for the determination of DFH using saliva as biological matrix. Linearity, precision, detection and quantification limit, accuracy and interference were analyzed. Infostat 8.0 student version software was used for statistical analysis. The method was linear in a range between 0.41 and 5ug/ml. The detection and quantification limits were 0.14 and 0.45ug/ml, respectively. The equation of the straight line obtained based on the method comparison between KIMS and HPLC-UV was DFHKIMS= 0,81* DFHHPLC – 0,03. The KIMS method proved to have the necessary analytical characteristics to be applied as a useful and practical tool for the follow-up of those patients with difficult venous access and/or children with chronic DFH treatments.
La Fenitoína (DFH), es un anticonvulsivante ampliamente utilizado para el tratamiento de distintos tipos de convulsiones.(1) El monitoreo terapéutico (TDM) es requerido para la DFH debido a su estrecho rango terapéutico y farmacocinética no lineal, entre otras características. Los monitoreos se realizan frecuentemente en plasma o suero (droga total) a través de métodos inmunológicos. También se puede monitorear DFH en saliva, la cual presenta una buena correlación con el plasma. La concentración de DFH en saliva refleja la concentración de droga libre y debido a la simplicidad en su recolección, conlleva a un proceso menos estresante para el paciente. El objetivo del trabajo fue validar el método inmunológico de interacción cinética de micropartículas en solución (KIMS) para la determinación de DFH usando como matriz biológica saliva. Se analizó linealidad, precisión, límite de detección y cuantificación, exactitud e interferencia. Se utilizó el software Infostat 8.0 versión estudiantil para el análisis estadístico. El método fue lineal en un intervalo entre 0,41 y 5ug/ml. Los límites de detección y cuantificación fueron 0,14 y 0,45ug/ml respectivamente. La ecuación de la recta obtenida en base a la comparación de métodos entre KIMS y HPLC-UV fue DFHKIMS= 0,81* DFHHPLC - 0,03. El método KIMS demostró tener las características analíticas necesarias paran ser aplicada como herramienta útil y práctica para el seguimiento de aquellos pacientes de difícil acceso venoso y/o niños con tratamientos crónicos con DFH.
Keywords: phenytoin; saliva; immunoassay; therapeutic monitoring.
Universidad Nacional de Córdoba