Objective: Laryngeal cancer is the second most common malignancy in the head and neck, with Epstein-Barr virus infection as a risk factor. Our aim is to evaluate correlations between the expression of lncRNA H19 and EBV infection in laryngeal cancer and H19 involvement in neoplastic progression through EZH2 association.
Materials and methods: 30 paired laryngeal tissue specimens (neoplastic and non-neoplastic) were included in the study. Nucleic acid isolation and cDNA synthesis was performed according to the manufacturer's protocol. EBV DNA and expression of lytic (BZLF1) and latent (LMP1) forms of infection were assessed in PCR assays; expression levels of H19 and EZH2 were quantified in qRT-PCR. Data was analysed using GraphPad Prism 5.0.
Results: Higher H19 relative expression in neoplastic vs paired non-neoplastic samples was found (p < 0.0001) with a significant increase in EBV DNA positive neoplasms (p = 0.0434). An inverse correlation between H19 and EZH2 expression levels was noticed in EBV positive cases. Additionally, increased levels of H19 in LMP1 positive samples compared with those positive for BZLF1 was found (p = 0.0593).
Conclusions: lncRNA H19 and EZH2 significantly contribute to the development of laryngeal carcinoma, being correlated with EBV infection markers.
L’associazione dell’espressione di lncRNA H19 e EZH2 nei pazienti affetti da carcinoma laringeo EBV positivo.
Obiettivo: Il cancro della laringe è il secondo tumore maligno più comune della testa e del collo, l’infezione da virus Epstein-Barr (EBV) viene annoverata come fattore di rischio. Il nostro scopo è valutare le correlazioni tra l’espressione di lncRNA H19 e l’infezione da EBV nel cancro della laringe e il coinvolgimento di H19 nella progressione della neoplasia attraverso l’associazione di EZH2.
Materiali e metodi: Sono stati studiati 30 campioni di tessuto laringeo (neoplastici e non neoplastici). Si è proceduto all’isolamento degli acidi nucleici e alla sintesi del cDNA secondo specifico protocollo. Il DNA dell’EBV e l’espressione delle forme di infezione litica (BZLF1) e latente (LMP1) sono state valutate nei test con PCR; i livelli di espressione di H19 ed EZH2 sono stati quantificati mediante qRT-PCR. I dati sono stati analizzati utilizzando GraphPad Prism 5.0.
Risultati: È stata trovata una maggiore espressione relativa di H19 nei campioni neoplastici rispetto a quelli non neoplastici (p < 0,0001) con un aumento significativo delle neoplasie positive al DNA di EBV (p = 0,0434). Una correlazione inversa tra i livelli di espressione di H19 ed EZH2 è stata notata nei casi positivi per EBV. Inoltre, è stato riscontrato un aumento dei livelli di H19 nei campioni LMP1 positivi rispetto a quelli BZLF1 (p = 0,0593).
Conclusioni: lncRNA H19 ed EZH2 contribuiscono in modo significativo allo sviluppo del carcinoma laringeo, essendo correlati con i marker di infezione da EBV.
Keywords: EBV; EZH2; infection marker; laryngeal carcinoma; lncRNA H19.
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