The influence of sample processing time on the performance of Microsporum canis cultures in cats

Vet Dermatol. 2022 Apr;33(2):113-e32. doi: 10.1111/vde.13039. Epub 2021 Nov 4.

Abstract

Background: Fungal culture is widely used as a diagnostic tool for detecting dermatophytosis. However, the presence of fungal contaminants can influence the culture's performance and compromise the diagnosis.

Objective: To verify whether the sample processing time can affect the performance of fungal culture for the diagnosis of Microsporum canis infection in cats.

Animals: Forty Persian cats.

Methods and materials: Hair and scale samples were collected by combing the coat using a 5 × 5 cm sterile polyester carpet. The carpets were assigned randomly to four groups based on time point of processing samples after collection (i.e. used for culture on a selective agar medium for dermatophytes): Group 1: 8 h (n = 10); Group 2: 24 h (n = 10); Group 3: 48 h (n = 10); and Group 4: 72 h (n = 10). Cultures were compared regarding the degree of fungal invasion by either M. canis or nondermatophytic contaminant moulds (NDM).

Results: Processing samples after 24 h of storage resulted in increased isolation rates of NDM and decreased isolation rates of M. canis. Samples processed after 48 h and 72 h presented more than half of the plates with a high degree of fungal contamination (i.e. NDM occupying ≥50% of the total fungal mass). However, samples processed after 8 h and 24 h presented a lower degree (P < 0.05) of NDM plate invasion and higher recovery rates of M. canis when compared to samples processed after 48 h and 72 h.

Conclusions and clinical importance: Delayed processing time is closely associated with the overgrowth of contaminants and with lower recovery rates of M. canis.

Contexte: La culture fongique est largement utilisée comme outil diagnostic de la dermatophytose. Cependant, la présence de contaminants fongiques peut influencer les performances de la culture et compromettre le diagnostic.

Objectif: Vérifier si le temps de traitement des échantillons peut affecter les performances de la culture fongique pour le diagnostic de l'infection à Microsporum canis chez le chat.

Animaux: Quarante chats persans. MATÉRIELS ET MÉTHODES: Des échantillons de poils et de squames ont été prélevés en peignant le pelage à l'aide d'un tapis en polyester stérile de 5 × 5 cm. Les tapis ont été assignés au hasard à quatre groupes en fonction du moment de traitement des échantillons après la collecte (c'est-à-dire utilisés pour la culture sur un milieu gélosé sélectif pour les dermatophytes) : Groupe 1, 8 h (n = 10) ; Groupe 2, 24 h (n = 10); Groupe 3, 48 h (n = 10); et Groupe 4, 72 h (n = 10). Les cultures ont été comparées en ce qui concerne le degré d'invasion fongique par M. canis ou par des moisissures contaminantes non dermatophytiques (NDM). RÉSULTATS: Le traitement des échantillons après > 24 h de stockage a entraîné une augmentation des taux d'isolement de NDM et une diminution des taux d'isolement de M. canis. Les échantillons traités après 48 h et 72 h présentaient plus de la moitié des plaques avec un degré élevé de contamination fongique (c'est-à-dire NDM occupant ≥ 50 % de la masse fongique totale). Cependant, les échantillons traités après 8 h et 24 h présentaient un degré inférieur (P < 0,05) d'invasion des plaques NDM et des taux de récupération plus élevés de M. canis par rapport aux échantillons traités après 48 h et 72 h.

Conclusions et importance clinique: Le temps de traitement retardé est étroitement associé à la prolifération de contaminants et à des taux de récupération plus faibles de M. canis.

INTRODUCCIÓN: el cultivo de hongos se usa ampliamente como una herramienta de diagnóstico para detectar dermatofitosis. Sin embargo, la presencia de hongos contaminantes puede influir en el rendimiento del cultivo y comprometer el diagnóstico. OBJETIVO: verificar si el tiempo de procesamiento de la muestra puede afectar el resultado del cultivo de hongos para el diagnóstico de la infección por Microsporum canis en gatos. ANIMALES: cuarenta gatos persas. MÉTODOS Y MATERIALES: Se recolectaron muestras de pelo y escamas peinando el pelaje usando un trozo de alfombra de poliéster estéril de 5 x 5 cm. Las piezas se asignaron aleatoriamente a cuatro grupos según el momento del procesamiento de las muestras después de la recolección (es decir, se usaron para cultivo en un medio de agar selectivo para dermatofitos): grupo 1, 8 h (n = 10); grupo 2, 24 h (n = 10); grupo 3, 48 h (n = 10); y grupo 4, 72 h (n = 10). Los cultivos se compararon con respecto al grado de invasión de hongos por M. canis o mohos contaminantes no dermatofíticos (NDM). RESULTADO: el procesamiento de muestras después de> 24 h de almacenamiento dio como resultado un aumento de las tasas de aislamiento de NDM y una disminución de las tasas de aislamiento de M. canis. Las muestras procesadas después de 48 h y 72 h presentaron más de la mitad de las placas con un alto grado de contaminación fúngica (es decir, NDM ocupando ≥50% de la masa fúngica total). Sin embargo, las muestras procesadas después de 8 h y 24 h presentaron un menor grado (P <0,05) de invasión de la placa NDM y mayores tasas de recuperación de M. canis en comparación con las muestras procesadas después de 48 h y 72 h. CONCLUSIONES E IMPORTANCIA CLÍNICA: un tiempo de procesamiento retrasado está estrechamente asociado con el crecimiento excesivo de contaminantes y con tasas de recuperación más bajas de M. canis.

Hintergrund: Die Pilzkultur wird weitreichend als diagnostische Methode zum Nachweis von Dermatophyten verwendet. Das Vorkommen von Pilzkontaminanten kann jedoch das Ergebnis der Kultur beeinflussen und die Diagnose beeinträchtigen. ZIEL: Es sollte nachgewiesen werden, ob die Zeit die Probe zu verarbeiten das Ergebnis der Pilzkultur bei der Diagnose von Microsporum canis Infektionen bei Katzen beeinträchtigen würde.

Tiere: Vierzig Perserkatzen.

Methoden und materialien: Es wurden Haare und Schuppenproben genommen, indem das Fell mit einem 5 x 5 cm sterilen Polyester Teppich durchgekämmt wurde. Die Teppiche wurden zufällig je nach Zeitpunkt der Probenverarbeitung nach der Entnahme (i.e. die Proben wurden für eine Kultur auf einem selektiven Agarmedium für Dermatophyten verwendet) in vier Gruppen eingeteilt: Gruppe 1, 8 h (n = 10); Gruppe 2, 24 h (n = 10); Gruppe 3, 48 h (n = 10); und Gruppe 4, 72 h (n = 10). Die Kulturen wurden je nach Wachstum der Pilzelemente entweder von M. canis oder nicht dermatophytischen Schimmelkontaminanten (NDM) verglichen.

Ergebnisse: Eine Weiterverarbeitung der Proben nach >24 h Lagerungszeit resultierte in einer Zunahme der Isolationsrate von NDM und einer geringeren Isolationsrate von M. canis. Proben, die nach 48 h und 72 h verarbeitet wurden, zeigten auf mehr als der Hälfte der Platten ein hohes Ausmaß an Kontamination mit Pilzelementen (i.e. NDM machte ≥der gesamten Pilzmasse aus). Proben, die nach 8 h und 24 h verarbeitet wurden, zeigten ein niedrigeres Ausmaß (P < 0,05) an NDM Wachstum auf der Platte und höhere Nachweisraten an M. canis im Vergleich zu Proben, die nach 48 h und 72 h verarbeitet wurden.

Schlussfolgerungen und klinische bedeutung: Eine verzögerte Verarbeitungszeit steht in einem engen Zusammenhang mit einem Überwachstum an Kontaminanten und einer geringeren Nachweisrate von M. canis.

背景: 真菌培養は、皮膚糸状菌症の診断ツールとして広く用いられている。しかし、真菌汚染物質の存在は、培養の性能に影響を与え、診断を危うくする可能性がある。 目的: 本研究の目的は、猫のMicrosporum canis感染症診断の真菌培養性能に、サンプル処理時間が影響するかどうかを検証することであった。 被検動物: 40匹のペルシャ猫。 材料と方法: 毛および鱗屑サンプルは、5×5cmの滅菌ポリエステルカーペットを用いて被毛を梳くことで採取した。カーペットは, 採取後にサンプルを処理する時点 (すなわち, 皮膚糸状菌用の選択的寒天培地での培養に使用する時点) に基づいて, 4つのグループに無作為に割り当てた。グループ1:8時間 (n=10) , グループ2:24時間(n=10) , グループ3:48時間 (n=10) , グループ4:72時間 (n=10) 。培養は、M. canisまたは非皮膚糸状菌汚染カビ (NDM) のいずれかによる真菌の侵襲の度合いについて比較した。 結果: 24時間以上保存した試料を処理すると, NDMの分離率が増加し, M. canisの分離率が減少した。48時間および72時間後に処理されたサンプルでは, プレートの半分以上が高度な真菌汚染を示した (NDMが全真菌量の50%以上を占めていた) 。しかし, 8時間後および24時間後に処理されたサンプルは, 48時間後および72時間後に処理されたサンプルと比較して, NDMのプレートへの侵入の程度が低く (P < 0.05) , M. canisの回収率が高かった。 結論および臨床上の重要性: 処理時間の遅延は、汚染物質の過剰増殖およびM. canisの回収率の低下と密接に関連している。.

背景: 真菌培养被广泛用作检测皮肤癣菌病的诊断工具。然而, 真菌污染物的存在可能影响培养基的表现并影响诊断。 目的: 验证样品处理时间是否影响用来诊断猫的犬小孢子菌感染的真菌培养基的表现。 动物: 40只波斯猫。 方法和材料: 使用5×5cm无菌聚酯材料采集毛发和鳞屑样本。根据采集后处理样本的时间点 (即用于皮肤癣菌选择性琼脂培养基培养) , 将样本随机分为4组: 第1组, 8 h(n = 10); 第2组, 24 h(n = 10); 第3组, 48 h(n = 10); 第4组, 72 h(n = 10)。比较犬小孢子菌或非皮肤癣菌的污染霉菌(NDM) 在培养基中的真菌侵袭程度。 结果: 储存 > 24 h后处理样品导致NDM分离率增加, 而犬小孢子菌分离率降低。48h和72h后处理的样品显示超过一半的平皿真菌污染程度高 (即NDM≥50%的真菌总质量) 。然而, 与48h和72h后处理的样本相比, 8h和24h后处理的样本呈现较低程度(P < 0.05)的NDM平皿侵袭和较高的犬小孢子菌生长率。 结论和临床重要性: 处理时间延迟与污染菌过度生长和犬小孢子菌生长率较低密切相关。.

Contexto: A cultura fúngica é amplamente utilizada como ferramenta diagnóstica na detecção de dermatofitose. No entanto, a presença de fungos contaminantes pode influenciar o desempenho da cultura e comprometer o diagnóstico.

Objetivo: Verificar se o tempo de processamento da amostra pode afetar o desempenho da cultura fúngica para o diagnóstico da infecção por Microsporum canis em gatos.

Animais: Quarenta gatos persas. MÉTODOS E MATERIAIS: Amostras de pelos e escamas foram coletadas através de escovação do pelo com um carpete de poliéster estéril de 5×5cm. Os carpetes foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos baseado no tempo de processamento das amostras após a coleta (ou seja, semeados para cultura em meio de ágar seletivo para dermatófitos): Grupo 1, 8 h (n=10); Grupo 2, 24 h (n=10); Grupo 3, 48 h (n=10); e Grupo 4, 72 h (n=10). As culturas foram comparadas quanto ao grau de crescimento de colônias fúngicas de M. canis ou fungos contaminantes não dermatofíticos (NDM).

Resultados: O processamento de amostras após >24 h de armazenamento resultou no aumento das taxas de isolamento de NDM e redução das taxas de isolamento de M. canis. As amostras processadas entre 48h e 72 h após coleta apresentaram mais da metade das placas com alto grau de contaminação fúngica (NDM ocupando ≥50% da massa fúngica total). No entanto, as amostras processadas entre 8 h e 24 h apresentaram menor grau (P <0,05) de crescimento de NDM na placa e maiores taxas de recuperação de M. canis quando comparadas às amostras processadas entre 48 h e 72 h após coleta. CONCLUSÕES E IMPORTÂNCIA CLÍNICA: O longo tempo de processamento das amostras está intimamente associado ao crescimento excessivo de contaminantes e às taxas de recuperação mais baixas de M. canis.

Publication types

  • Clinical Trial, Veterinary

MeSH terms

  • Animals
  • Cat Diseases* / diagnosis
  • Cats
  • Dermatomycoses* / diagnosis
  • Dermatomycoses* / microbiology
  • Dermatomycoses* / veterinary
  • Hair / microbiology
  • Microsporum
  • Specimen Handling / veterinary

Supplementary concepts

  • Microsporum canis