Evaluation of the cutaneous inflammatory cells in dogs with leishmaniosis and in dogs without the disease that were naturally infected by Leishmania infantum (syn. L. chagasi)

Vet Dermatol. 2021 Apr;32(2):99-e19. doi: 10.1111/vde.12922. Epub 2020 Dec 28.

Abstract

Background: Canine leishmaniosis (CanL) is associated with an aberrant cutaneous immune response. Few studies have compared cutaneous immune cells among dogs with leishmaniosis or infected without leishmaniosis, and noninfected dogs.

Hypothesis/objective: Evaluate the number of neutrophils, histiocytes, T lymphocytes, T-bet-positive, GATA3-positive, FoxP3-positive and interleukin (IL)-17-positive cells, in lesional (Group A) and normal-looking (Group B) skin of nine dogs with stage II/III leishmaniosis; in normal-looking PCR-positive (Group C; n = 6) or PCR-negative (Group D; n = 6) skin of infected dogs; and in the normal-looking skin of 12 noninfected dogs (Group E).

Methods and materials: Diagnosis of CanL considered clinical signs, clinicopathological abnormalities, detection of Leishmania amastigotes in lymph nodes, and/or bone marrow and positive serological results. Paraffin-embedded skin biopsies were processed for routine immunofluorescence and positive cells were identified using commercially available anti-canine antibodies.

Results: In Group A, there was a significantly higher number of neutrophils (P < 0.001), histiocytes (P = 0.012), T lymphocytes (P = 0.011), GATA3-positive (P = 0.02) and IL-17A-positive (P = 0.002) cells compared to Group E. In Group B, there was a significantly higher number of histiocytes (P = 0.02), T lymphocytes (P = 0.004), GATA3-positive (P = 0.006) and FoxP3-positive (P = 0.028) cells compared to Group E. There was no difference in between groups A and B and between groups C or D and E.

Conclusions and clinical importance: In the lesional and/or normal-looking skin of dogs with moderate/severe CanL there is an infiltration of neutrophils, histiocytes, T lymphocytes, GATA3-, FoxP3- and IL17A-positive cells. By contrast, the number of these cells is not increased in the normal-looking skin of infected dogs without CanL compared to the skin of noninfected dogs.

Contexte: La leishmaniose canine (CanL) est associée avec une réponse immunitaire cutanée aberrante. Peu d’études ont comparé les cellules immunitaires cutanées entre les chiens avec leishmaniose ou infectés sans leishmaniose, et non infectés. HYPOTHÈSE/OBJECTIF: Evaluer le nombre de neutrophiles, histiocytes, lymphocytes T et cellules T-bet-positives, GATA3-positives, FoxP3-positives et interleukine (IL)-17 positives, dans la peau lésionnelle (Groupe A) et d’aspect normal (Groupe B) de neuf chiens avec leishmaniose stade II/III ; dans la peau d’aspect normal PCR-positive (Groupe C ; n=6) ou PCR-négative (Groupe D ; n=6) de chiens infectés ; et dans la peau d’aspect normal de 12 chiens non infectés (Groupe E). MATÉRIELS ET MÉTHODES: Le diagnostic de CanL repose sur les signes cliniques, les anomalies clinicopathologiques, la détection d’amastigotes de Leishmania dans les nœuds lymphatiques et/ou la moelle osseuse et les résultats sérologiques positifs. Les biopsies cutanées montées dans la paraffine ont été préparées pour immunofluorescence de routine et les cellules positives ont été mises en évidence par des anticorps anti-canin disponibles dans le commerce. RÉSULTATS: Dans le Groupe A, il y avait un nombre significativement plus élevé de neutrophiles (P < 0.001), histiocytes (P = 0.012), lymphocytes T(P = 0.011), cellules GATA3-positive (P = 0.02) et IL-17A-positive (P = 0.002) comparé au Groupe E. Dans le Groupe B, il y avait un nombre significativement plus élevé d’histiocytes (P = 0.02), lymphocytes T (P = 0.004), cellules GATA3-positive (P = 0.006) et FoxP3-positive (P = 0.028) comparé au Groupe E. Il n’y avait pas de différence entre les groupes A et B et entre les groupes C ou D et E.

Conlsusions et imprtance clinique: Au sein de la peau lésionnelle et/ou d’aspect normale de chiens avec CanL modére/sévère il y avait une infiltration de neutrophiles, histiocytes, lymphocytes T, cellules GATA-3, FOX-3 et IL17A positives. En revanche, le nombre de ces cellules n’est pas augmentée dans la peau d’aspect normal des chiens infectés sans CanL comparé à la peau de chiens non infectés.

INTRODUCCIÓN: la leishmaniosis canina (CanL) se asocia con una respuesta inmunitaria cutánea aberrante. Pocos estudios han comparado las células inmunitarias cutáneas entre perros con leishmaniosis o infectados sin leishmaniosis y perros no infectados. HIPÓTESIS/OBJETIVO: Evaluar el número de neutrófilos, histiocitos, linfocitos T, células T-bet-positivas, GATA3-positivas, FoxP3-positivas e interleuquina (IL)-17-positivas, enzonas de piel lesionadas (Grupo A) y de apariencia normal (Grupo B) piel de nueve perros con leishmaniosis en estadio II/III; en la piel de perros infectados con PCR positiva (Grupo C; n = 6) o PCR negativa (Grupo D; n = 6) de aspecto normal; y en la piel de aspecto normal de 12 perros no infectados (Grupo E). MÉTODOS Y MATERIALES: el diagnóstico de CanL consideró signos clínicos, anomalías clínico-patológicas, detección de amastigotes de Leishmania en ganglios linfáticos y/o médula ósea y resultados serológicos positivos. Las biopsias de piel incluidas en parafina se procesaron para inmunofluorescencia de rutina y las células positivas se identificaron utilizando anticuerpos anti-caninos disponibles comercialmente. RESULTADOS: en el grupo A, hubo un número significativamente mayor de neutrófilos (P <0,001), histiocitos (P = 0,012), linfocitos T (P = 0,011), célula positivas para GATA3 (P = 0,02) e IL-17A positivas (P = 0,002) en comparación con el Grupo E. En el Grupo B, hubo un número significativamente mayor de histiocitos (P = 0,02), linfocitos T (P = 0,004), células GATA3 positivas (P = 0,006) y FoxP3 positivas (P = 0,028) en comparación con el Grupo E. No hubo diferencias entre los grupos A y B ni entre los grupos C o D y E. CONCLUSIONES E IMPORTANCIA CLÍNICA: en la piel lesionada y/o de aspecto normal de perros con CanL moderada/grave hay una infiltración de neutrófilos, histiocitos, linfocitos T, células positivas para GATA3, FoxP3 e IL17A. Por el contrario, el número de estas células no aumenta en la piel de aspecto normal de los perros infectados sin CanL en comparación con la piel de los perros no infectados.

Hintergrund: Die canine Leishmaniose (CanL) wird mit einer abnormen kutanen Immunantwort in Verbindung gebracht. Wenige Studien haben die kutanen Immunzellen bei Hunden mit Leishmaniose oder infizierten ohne Leishmaniose und nicht-infizierten Hunden verglichen.

Hypothese/ziele: Eine Evaluierung der Neutrophilen, Histiozyten, T Lymphozyten, T-bet-positiven, GATA3-positiven, FoxP3-positiven und Interleukin (IL)-17-positiven Zellen, in Hautveränderungen (Gruppe A) und normal aussehender Haut (Gruppe B) von neun Hunden mit Stadium II/III der Leishmaniose; in einer Gruppe mit normal aussehender PCR-positiver (Gruppe C; n = 6) oder PCR-negativer (Gruppe D; n = 6) Haut von infizierten Hunden; sowie in normal aussehender Haut von 12 nicht-infizierten Hunden (Gruppe E).

Methoden und materialien: Für eine Diagnose von CanL wurden klinische Zeichen, klinisch-pathologische Abnormalitäten, die Detektion von Leishmania Amastigoten im Lymphknoten, und/oder Knochenmark sowie positive serologische Ergebnisse in Betracht gezogen. In Paraffin-gebettete Hautbiopsien wurden für Routine Immunfluoreszenz weiterverarbeitet und positive Zellen mittels kommerziell erhältlichen anti-caninen Antikörpern identifiziert.

Ergebnisse: In Gruppe A gab es eine signifikant höhere Anzahl an Neutrophilen (P < 0,001), Histiozyten (P = 0,012), T Lymphozyten (P = 0,011), GATA3-positiven (P = 0,02) und IL-17A-positiven (P = 0,002) Zellen im Vergleich zu Gruppe E. In Gruppe B bestand eine signifikant höhere Anzahl an Histiozyten (P = 0,02), T Lymphozyten (P = 0,004), GATA3-positiver (P = 0,006) und FoxP3-positiver (P = 0,028) Zellen im Vergleich zu Gruppe E. Es bestand kein Unterschied zwischen Gruppen A und B und zwischen den Gruppen C oder D und E.

Schlussfolgerungen und klinische bedeutung: In der läsionalen und/oder normal-aussehenden Haut von Hunden mit moderaten/schweren CanL kommt eine Infiltration mit Neutrophilen, Histiozyten, T Lymphozyten, GATA3-, FoxP3- und IL17A-positiven Zellen vor. Im Vergleich dazu war die Anzahl dieser Zellen in der normal aussehenden Haut der infizierten Hunde ohne CanL im Vergleich zur Haut nicht-infizierter Hunde nicht erhöht.

背景: 犬リーシュマニア症 (CanL) は、異常な皮膚免疫反応に関連している。リーシュマニア症の犬またはリーシュマニア症なしで感染した犬と感染していない犬の間で皮膚免疫細胞を比較した研究はほとんどない。 仮説/目的: 本研究の目的は、ステージII / IIIのリーシュマニア症の9頭の犬の病変皮膚 (グループA) および正常に見える皮膚 (グループB) 、感染犬の正常に見えるPCR陽性の皮膚 (グループC; n = 6) またはPCR陰性の皮膚 (グループD; n = 6) 、そして感染していない12頭の犬の正常に見える皮膚 (グループE) の好中球、組織球、Tリンパ球、T-bet陽性、GATA3陽性、FoxP3陽性、インターロイキン (IL) -17陽性細胞の数を評価することであった。 材料と方法: CanLの診断では、臨床徴候、臨床病理学的異常、リンパ節におけるリーシュマニアアマスティゴートの検出、および/または骨髄および血清学的結果陽性が考慮された。パラフィン包埋皮膚生検をルーチン免疫蛍光法のため処理し、市販抗イヌ抗体を使用して陽性細胞を同定した。 結果: グループAはグループEと比較して、好中球 (P <0.001) 、組織球 (P = 0.012) 、Tリンパ球 (P = 0.011) 、GATA3陽性 (P = 0.02) 、IL-17A陽性 (P = 0.002) の数が有意に多かった。グループBはグループEと比較して、組織球 (P = 0.02) 、Tリンパ球 (P = 0.004) 、GATA3陽性 (P = 0.006) 、FoxP3陽性 (P = 0.028の数が有意に多かった。グループAB間、およびグループCまたはDE間では相違なかった。 結論と臨床的重要性: 中等度/重度のCanL犬の病変および/または正常に見える皮膚には、好中球、組織球、Tリンパ球、GATA3、FoxP3、およびIL17A陽性細胞の浸潤がある。対照的に、これらの細胞数は、感染していない犬の皮膚と比較して、CanLのない感染犬の正常に見える皮膚では増加しない。.

背景: 犬利什曼病(CanL)可引起皮肤免疫应答异常。很少有研究比较利什曼病患犬或无利什曼病的感染犬和非感染犬的皮肤免疫细胞。 假设/目的: 评价9只II/III期利什曼病犬, 其病变 (A组) 和外观正常 (B组) 的皮肤的中性粒细胞、组织细胞、T淋巴细胞、T-bet-阳性、GATA3阳性、FoxP3阳性和白介素(IL)-17阳性细胞数量; 外观正常的PCR阳性 (C组; n=6) 或PCR阴性 (D组; n=6) 的感染犬皮肤; 以及12只非感染犬 (E组) 外观正常的皮肤。 方法和材料: CanL的诊断考虑了临床体征、临床病理学异常、淋巴结和/或骨髓中利什曼原虫无鞭毛体的检测和阳性血清学结果。对石蜡包埋的皮肤活检组织进行常规免疫荧光处理, 并使用市售抗犬抗体鉴定阳性细胞。 结果: A组的中性粒细胞(P<0.001)、组织细胞(P=0.012)、T淋巴细胞(P=0.011)、GATA3阳性(P=0.02)和IL-17A阳性(P=0.002)细胞数量显著高于E组。B组的组织细胞数量显著更高(P = 0.02), 与E组相比, T淋巴细胞(P=0.004)、GATA3阳性(P=0.006)和FoxP3阳性(P=0.028)细胞。A组和B组之间,以及C组或D组和E组之间无差异。 结论和临床重要性: 在中度/重度CanL犬的病变和/或外观正常的皮肤中, 存在中性粒细胞、组织细胞、T淋巴细胞、GATA3、FoxP3和IL17A阳性细胞浸润。相比之下, 与未感染犬的皮肤相比, 在无CanL的感染犬的正常外观皮肤中,这些细胞的数量未增加。.

Contexto: A leishmaniose canina (CanL) está associada a uma resposta imune cutânea aberrante. Poucos estudos compararam células imunes cutâneas entre cães com leishmaniose ou infectados sem leishmaniose e cães não infectados. HIPÓTESE/OBJETIVO: Avaliar o número de neutrófilos, histiócitos, linfócitos T, células T-bet-positivas, GATA3-positivas, FoxP3-positivas e interleucina (IL) -17-positivas, em pele lesional (Grupo A) e de aparência normal (Grupo B) de nove cães com leishmaniose em estágio II / III; em pele de cães infectados positiva por PCR de aparência normal (Grupo C; n = 6) ou negativa por PCR (Grupo D; n = 6); e na pele de aparência normal de 12 cães não infectados (Grupo E). MÉTODOS E MATERIAIS: O diagnóstico do CanL foi baseado nos sinais clínicos, anormalidades clínico-patológicas, detecção de formas amastigotas de Leishmania em linfonodos e/ou medula óssea e resultados sorológicos positivos. As biópsias de pele incluídas em blocos de parafina foram processadas para imunofluorescência de rotina e as células positivas foram identificadas usando anticorpos anticaninos disponíveis no mercado.

Resultados: No Grupo A, houve um número significativamente maior de neutrófilos (P <0,001), histiócitos (P = 0,012), linfócitos T (P = 0,011), células GATA3-positivas (P = 0,02) e IL-17A-positivas ( P = 0,002) em comparação com o Grupo E. No Grupo B, houve um número significativamente maior de histiócitos (P = 0,02), linfócitos T (P = 0,004), células GATA3-positivas (P = 0,006) e FoxP3-positivas (P = 0,028) em comparação com o Grupo E. Não houve diferença entre os grupos A e B e entre os grupos C ou D e E. CONCLUSÕES E IMPORTÂNCIA CLÍNICA: Na pele com lesões e/ou aparência normal de cães com CanL moderada/grave há infiltração de neutrófilos, histiócitos, linfócitos T, células GATA3-, FoxP3- e IL17A-positivas. Em contraste, o número dessas células não está aumentado na pele de aparência normal de cães infectados sem CanL em comparação com a pele de cães não infectados.

MeSH terms

  • Animals
  • Biopsy / veterinary
  • Dog Diseases*
  • Dogs
  • Leishmania infantum*
  • Leishmaniasis* / veterinary
  • Skin