Molecular typing of Candida albicans isolates from hospitalized patients

Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 2013 Nov-Dec;55(6):385-91. doi: 10.1590/S0036-46652013000600003.

Abstract

Introduction: The majority of nosocomial fungal infections are caused by Candida spp. where C. albicans is the species most commonly identified. Molecular methods are important tools for assessing the origin of the yeasts isolated in hospitals.

Methods: This is a study on the genetic profiles of 39 nosocomial clinical isolates of C. albicans using two typing methods: random amplified polymorphic DNA (RAPD) and microsatellite, two different primers for each technique were used.

Results: RAPD provided 10 and 11 different profiles with values for S(AB) of 0.84 ± 0.126 and 0.88 ± 0.08 for primers M2 and P4, respectively. Microsatellite using two markers, CDC3 and HIS3, allowed the observation of six and seven different alleles, respectively, with combined discriminatory power of 0.91.

Conclusions: Although genetic variability is clear, it was possible to identify high similarity, suggesting a common origin for at least a part of isolates. It is important to emphasize that common origin was proven from yeasts isolated from colonization (urine, catheter or endotracheal secretions) and blood culture from the same patient, indicating that the candidemia must have started from a site of colonization. The combination of RAPD and microsatellite provides a quick and efficient analysis for investigation of similarity among nosocomial isolates of C. albicans.

RESUMO: Introdução: A maioria das infecções fúngicas hospitalares são causadas por Candida spp. e C. albicans é a espécie mais comumente identificada. Métodos moleculares são ferramentas importantes para a avaliação da origem das leveduras isoladas em hospitais.

Métodos: Este é um estudo sobre o perfil genético de 39 isolados clínicos nosocomiais de C. albicans através das técnicas de RAPD e microssatélite, foram usados dois diferentes iniciadores para cada técnica.

Resultados: RAPD forneceu 10 e 11 diferentes perfis com valores de SAB 0,84 ± 0,126 e 0,88 ± 0,08 para os primers M2 e P4, respectivamente. A análise de microssatélites, usando os marcadores CDC3 e HIS3 permitiu a observação de seis e sete diferentes alelos respectivamente, com poder discriminatório combinado de 0,91.

Conclusões: Embora seja clara a variabilidade genética, foi possível identificar alta similaridade, sugerindo origem comum para pelo menos parte deles. É importante enfatizar que foi comprovada origem comum de leveduras isoladas de colonização (urina, cateter ou secreção orotraqueal) e hemocultura do mesmo paciente, indicando que a candidemia deve ter iniciado a partir de um sítio de colonização. A combinação das técnicas RAPD e microssatélites fornece uma análise rápida e eficiente para investigação de similaridade entre isolados nosocomiais de C. albicans.

MeSH terms

  • Candida albicans / classification
  • Candida albicans / genetics*
  • Candida albicans / isolation & purification
  • Candidiasis / microbiology*
  • Cross Infection / microbiology*
  • DNA Primers / genetics
  • DNA, Fungal / genetics
  • Electrophoresis, Gel, Pulsed-Field
  • Genotype
  • Humans
  • Microsatellite Repeats
  • Mycological Typing Techniques
  • Random Amplified Polymorphic DNA Technique

Substances

  • DNA Primers
  • DNA, Fungal