Background: Since blood culture bottles are validated by the manufacturer for blood only, an additional validation for the use with fluids of tissue preparations is necessary.
Methods: Two 10-ml samples of cornea culture medium, histidine-tryptophan-ketoglutarate (HTK) solution, or Ringer solution at the end of femur head thermo-disinfection were given into blood culture bottles (BD BACTEC™ Plus Aerobic/F, Anaerobic/F for cornea culture medium and BD BACTEC™ Standard Aerobic/Anaerobic for HTK and Ringer solution) and subsequently spiked with 10-100 colony forming units (CFU) of bacteria or fungi (aerobic bacteria: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa; anaerobic bacteria: Clostridium sporogenes; fungi: Candida albicans, Aspergillus brasiliensis) according to the European Pharmacopoeia Chapter 2.6.1.
Results: All tested bacteria and fungi could be detected in all solutions. All positive and negative controls were tested correctly. Compared to the positive controls, the microbial growth was delayed in the antibiotic-containing cornea culture medium, and negative in two cases of B. subtilis spiking.
Conclusion: The use of BACTEC™ blood culture bottles seems to be a suitable method for microbiological testing of HTK solution, Ringer solution, and, with limitations, also for testing of the antibiotic-containing cornea culture medium.
Hintergrund: Da Blutkulturflaschen vom Hersteller nur für den Einsatz mit Blut validiert sind, bedarf es einer zusätzlichen Validierung für Flüssigkeiten von Gewebezubereitungen.
Methoden: Zwei 10-ml-Proben von Hornhautkulturmedium, Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat (HTK)-Lösung und Ringer-Lösung am Ende der Femur-kopf-Thermodesinfektion wurden in Blutkulturflaschen gegeben (BD BACTEC™ Plus Aerobic/F, Anaerobic/F für Hornhautkulturmedium, BD BACTEC™ Standard Aerobic/Anaerobic für HTK- und Ringer-Lösung) und nachfolgend mit 10–100 colony Forming Units (CFU) von Bakterien und Pilzen (aerobe Bakterien: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa; anaerobe Bakterien: Clostridium sporogenes; Pilze: Candida albicans, Aspergillus brasiliensis) gemäß der Europäischen Pharmacopoeia Chapter 2.6.1. beimpft.
Ergebnisse: Alle eingesetzten Bakterien und Pilze konnten in allen Flüssigkeiten detektiert werden. Alle positiven und negativen Kontrollen wurden korrekt getestet. Im Vergleich zu den positiven Kontrollen war das mikrobielle Wachstum in dem antibiotikahaltigen Hornhautkulturmedium verzögert und bei B. subtilis in zwei Fällen negativ.
Schlussfolgerung: Der Einsatz von BACTEC™ Blutkulturflaschen scheint eine geeignete Methode für die mikrobiologische Testung von HTK-Lösung, Ringer-Lösung und mit Einschränkungen auch für die Testung von antibiotikahaltigem Hornhautkulturmedium zu sein.
Keywords: Microbiology; Tissue; Validation.