In vitro excystation of cysts of microscopically identified Chilomastix mesnili and Retortamonas sp. isolated from Japanese macaques and Retortamonas sp. isolated from small Indian mongooses could be induced using an established protocol for Giardia intestinalis and subsequently by culturing with H2S-rich Robinson's medium supplemented with Desulfovibrio desulfuricans. Excystation usually began 2 h after incubation in Robinson's medium. DNA was isolated from excysted flagellates after 4 h of incubation or from cultured excysted flagellates. Phylogenetic analysis based on their 18S rRNA genes revealed that two isolates of C. mesnili from Japanese macaques belonged to the same cluster as a C. mesnili isolate from humans, whereas a mammalian Retortamonas sp. isolate from a small Indian mongoose belonged to the same cluster as that of an amphibian Retortamonas spp. isolate from a 'poison arrow frog' [sequence identity to AF439347 (94.9%)]. These results suggest that the sequence homology of the 18S rRNA gene of the two C. mesnili isolates from Japanese macaques was similar to that of humans, in addition to the morphological similarity, and Retortamonas sp. infection of the amphibian type in the small Indian mongoose highlighted the possibility of the effect of host feeding habitats.
Excistação in vitro de cistos de Chilomastix mesnili e Retortamonas sp. identificados microscopicamente, isolados de macacos japoneses e Retortamonas sp. isolados de um pequeno mangusto indiano podem ser induzidos usando um protocolo estabelecido para Giardia intestinalis e, subsequentemente por cultura com meio de Robinson rico em H2S suplementado com Desulfovibrio desulfuricans. A excistação geralmente começou 2 h após a incubação em meio de Robinson. O DNA foi isolado de flagelados excistados após 4 h de incubação ou de flagelados excistados cultivados. A análise filogenética baseada em seus genes 18S rRNA revelou que dois isolados de C. mesnili de macacos japoneses pertenciam ao mesmo grupo que um isolado de C. mesnili de um humano, enquanto um isolado de Retortamonas sp. de um mamífero, o pequeno mangusto indiano, pertencia ao mesmo agrupamento do isolado de Retortamonas spp. do anfíbio, ’sapo ponta-de-flecha’ [identidade sequencial para AF439347 (94,9%)]. Esses resultados sugeriram que a homologia sequencial do gene 18S rRNA dos dois isolados de C. mesnili de macacos japoneses era semelhante a de um humano, além da semelhança morfológica, e a infecção de Retortamonas sp. do tipo anfíbio ao pequeno mangusto indiano destacou a possibilidade de ser afetado pelo habitat alimentar de seu hospedeiro.