Objective: To study the effect of fluoxetine on Th17- and Th1-immune response, which plays an important role in the pathogenesis of multiple sclerosis (MS).
Material and methods: Ten patients with relapsing-remitting MS and ten healthy subjects were examined. The functions of Th17- and Th1-immune responses were assessed by the production of cytokines interleukin-17 (IL-17) and interferon-gamma (IFN-γ) by CD4+ T cells stimulated with macrophages or microbeads coated with anti-CD3 and anti-CD28-antibodies. To assess the effect of fluoxetine on the macrophages-induced Th17- and Th1-immune response, macrophages were pre-incubated in the presence of fluoxetine and co-cultured with autologous CD4+ T-cells. In the case of stimulation of CD4+ T-cells with anti-CD3/CD28-microbeads, fluoxetine was added directly to the T-helper cells before adding of microbeads. In addition, we evaluated the effect of fluoxetine on the production of the factors of differentiation of Th17-cells cytokines IL-6 and IL-1β by macrophages. The levels of cytokines in the cell culture supernatants were measured by ELISA.
Results: The production of IL-17 and IFN-γ by CD4+ T-cells stimulated with macrophages or anti-CD3/CD28-microbeads was comparable between the groups. Fluoxetine suppressed the production of IL-17 and IFN-γ by anti-CD/CD28-stimulated CD4+ T-cells in both groups. Fluoxetine also suppressed the production of IL-6 and IL-1β by macrophages as well as their ability to induce IL-17 and IFN-γ production by CD4+ T-cells in both groups.
Conclusions: Fluoxetine may have an anti-inflammatory effect in MS that could be mediated by suppression of Th17- and Th1-cells or macrophage-induced Th17- and Th1-immune response.
Цель исследования: Изучить влияние флуоксетина на патогенетически значимый при рассеянном склерозе (РС) Th17- и Th1-иммунный ответ.
Материал и методы: Обследованы 10 больных ремиттирующим РС и 10 здоровых доноров. Th17- и Th1-иммунный ответ оценивали по продукции цитокинов интерлейкина-17 (ИЛ-17) и интерферона-γ (ИФН-γ) CD4+ T-клетками, активированными макрофагами или микрочастицами, покрытыми анти-CD3/CD28-антителами. Для оценки влияния флуоксетина на индуцируемый макрофагами Th17- и Th1-иммунный ответ макрофаги преинкубировали в присутствии флуоксетина и проводили ко-культивирование с аутологичными CD4+ T-клетками. В случае стимуляции CD4+ T-клеток анти-CD3/CD28-микрочастицами флуоксетин вносили непосредственно к T-хелперам перед внесением микрочастиц. Кроме того, оценивалось влияние флуоксетина на продукцию макрофагами факторов дифференцирования Th17-клеток — цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-1β. Уровни цитокинов в супернатантах клеточной культуры измеряли методом иммуноферментного анализа.
Результаты: Продукция ИЛ-17 и ИФН-γ CD4+ T-клетками, стимулированными макрофагами или анти-CD3/CD28-микрочастицами, была сопоставима между группами. Продукция ИЛ-6 и ИЛ-1β макрофагами больных РС и здоровых доноров также была сопоставима. Флуоксетин подавлял выработку ИЛ-17 и ИФН-γ анти-CD3/CD28-стимулированными CD4+ T-клетками в обеих группах. Кроме того, флуоксетин подавлял продукцию ИЛ-6 и ИЛ-1β макрофагами, а также их способность индуцировать продукцию ИЛ-17 и ИФН-γ CD4+ T-клетками в обеих группах.
Заключение: Флуоксетин может оказывать противовоспалительное влияние при РС, оказывая ингибирующий эффект непосредственно на Th17- и Th1-клетки, а также на индуцируемый макрофагами Th17- и Th1-иммунный ответ.
Keywords: Th17- and Th1-cells; fluoxetine; macrophages; multiple sclerosis; neuroimmune interaction.