The aim of the work is to assess the prevalence of hepatitis B virus drug resistance mutations and immune escape mutations in pregnant women in the Republic of Guinea.
Materials and methods: Blood plasma samples obtained from 480 pregnant women from different regions of the Republic of Guinea with laboratory-confirmed viral hepatitis B were studied. Nucleotide sequences for genotype identification and mutation detection were obtained using nested-PCR followed by Sanger sequencing, based on overlapping pairs of primers spanning the complete genome of the virus.
Results and discussion: In the examined group, the viral genotype E was the most prevalent (92.92%) compared with subgenotypes A1 (1.67%), A3 (1.46%), D1 (0.63%), D2 (1.04%) and D3 (2.29%). Among the examined HBV-infected pregnant women, 188 (39.17%) had undetectable HBsAg. Drug resistance mutations were detected in 33 individuals, which amounted to 6.88%. The following mutations were found: S78T (27.27%), L80I (24.24%), S202I (15.15%), M204I/V (42.42%). The presence of polymorphic variants not described as drug resistant has also been shown in positions associated with the development of drug resistance to tenofovir, lamivudine, telbivudine and entecavir (L80F, S202I, M204R). When analyzing the MHR and the region of a determinant, mutations were detected in 318 (66.25%) of pregnant women. In 172 of them, which amounted to 54.09%, multiple mutations were found. The amino acid substitutions in 13 positions associated with HBsAg-negative hepatitis B and/or potentially affecting HBsAg antigenicity were identified.
Conclusion: The high prevalence of immune escape and drug resistance mutations potentially associated with false-negative result of HBsAg screening, prophylaxis failure, and virological failure of therapy that has been identified among treatment naive pregnant women imposes a serious problem.
Введение. Несмотря на все усилия по ограничению передачи вируса гепатита В (ВГВ) от матери ребёнку, понимание течения хронического гепатита В (ХГВ) у беременных женщин всё ещё ограниченно. Одним из регионов с крайне высокой распространённостью ХГВ является Африка: здесь суммарное количество больных составляет приблизительно 75 млн человек. Кроме того, серьёзным фактором, способным повлиять как на лечение, так и на вакцинную профилактику, могут являться мутации вируса. Таким образом, изучение генетической гетерогенности ВГВ является значимым. Цель работы оценить распространённость мутаций лекарственной устойчивости и мутаций ускользания от иммунного ответа ВГВ у беременных женщин в Гвинейской Республике. Материалы и методы. Исследованы образцы плазмы крови, полученные от 480 беременных женщин из разных регионов Гвинейской Республики с лабораторно подтверждённым ВГВ. Нуклеотидные последовательности для определения генотипов и выявления мутаций получали с использованием nested-ПЦР с последующим секвенированием по Сэнгеру на базе перекрывающихся пар праймеров, совместно фланкирующих полный геном вируса. Результаты и обсуждение. В обследованной группе чаще всего обнаруживали вирус генотипа Е (92,92%) по сравнению с субгенотипами А1 (1,67%), А3 (1,46%), D1 (0,63%), D2 (1,04%) и D3 (2,29%). Среди обследованных ВГВ-инфицированных беременных было выявлено 188 человек (39,17%) с неопределяемым HBsAg. Мутации лекарственной устойчивости вируса были выявлены у 33 человек, что составило 6,88%. Обнаружены следующие мутации: S78T (27,27%), L80I (24,24%), S202I (15,15%), M204I/V (42,42%). Показано также наличие полиморфных вариантов, не описанных как фармакорезистентные, в положениях, связанных с развитием лекарственной устойчивости к тенофовиру, ламивудину, телбивудину и энтекавиру (L80F, S202I, M204R). При анализе MHR и региона детерминанты мутации выявлены у 318 (66,25%) беременных. Из них у 172 человек, что составило 54,09%, обнаружены множественные мутации. Определено наличие замен в 13 позициях, ассоциированных с HBsAg-негативным ХГВ и (или) потенциально влияющих на антигенность HBsAg. Заключение. Выявленная среди терапевтически наивных беременных женщин широкая распространённость мутаций иммунного бегства и лекарственной устойчивости, способных приводить к ложноотрицательным результатам скрининга на HBsAg, безуспешной профилактике и вирусологической неэффективности терапии ВГВ-инфекции, представляет собой серьёзную проблему.
Keywords: Republic of Guinea; clinically significant mutations; drug resistance mutations; escape mutations; hepatitis В virus; laboratory diagnostics; occult hepatitis B infection; pregnant women; viral hepatitis B.