Objective: To analyze the expression of several previously unstudied miRNAs from the DLK1-DIO3 locus in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and in CD14+ and CD4+ cell subpopulations in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) and healthy individuals.
Material and methods: MiRNA expression analysis was performed in PBMC, CD14+, and CD4+ cells of 14 patients who did not take immunomodulatory drugs, and 14 individuals without autoimmune and inflammatory diseases by reverse transcription followed by real-time PCR.
Results: Expression levels of 10 miRNAs selected based on different criteria were significantly higher in PBMC in men with RRMS compared to healthy men; in women, their expression did not change in a similar comparison. No mass unidirectional changes in the expression of these miRNAs in RRMS men were observed in CD14+ and CD4+ cells. High consistency in the expression of miRNA pairs was also not found.
Conclusions: The analysis of PBMC showed the involvement of 10 more miRNAs encoded by genes from the DLK1-DIO3 locus in the development of RRMS. The main observed effect of the increase in the expression levels of these miRNAs in men with RRMS compared with healthy men is not achieved due to the contribution of CD14+ and CD4+ cells. This opens up possibilities for studying the involvement of miRNAs in other PBMC subpopulations in the pathological processes in RRMS.
Цель исследования: Анализ экспрессии нескольких ранее не изученных микроРНК из локуса DLK1-DIO3 в мононуклеарных клетках крови (МНК) и клеточных субпопуляциях CD14+ и CD4+ у больных ремиттирующим рассеянным склерозом (РРС), а также здоровых индивидов.
Материал и методы: Анализ экспрессии микроРНК проводили в МНК, CD14+ и CD4+ клетках 14 больных РРС, не принимавших иммуномодулирующие препараты, и 14 индивидов без аутоиммунных и воспалительных заболеваний методом обратной транскрипции с последующей ПЦР в реальном времени.
Результаты: Уровни экспрессии 10 выбранных на основании разных критериев микроРНК были значимо выше в МНК у мужчин, больных РРС, по сравнению со здоровыми мужчинами; у женщин их экспрессия не отличалась при аналогичном сравнении. В CD14+ и CD4+ клетках массовых однонаправленных изменений экспрессии этих микроРНК у мужчин с РРС не наблюдали. Высокой согласованности экспрессии пар микроРНК обнаружено не было.
Заключение: При анализе МНК показана вовлеченность еще 10 микроРНК, кодируемых генами из локуса DLK1-DIO3, в развитии РРС. Основной наблюдаемый эффект возрастания уровней экспрессии этих микроРНК у мужчин с РРС по сравнению со здоровыми мужчинами достигается не за счет вклада CD14+ и CD4+ клеток. Это открывает возможности для исследования вовлеченности микроРНК из других клеточных субпопуляций МНК в патологические процессы при РРС.
Keywords: CD14+ cells; CD4+ cells; imprinted DLK1-DIO3 locus; miRNA; multiple sclerosis.