[Isolation of neurospheres and neural progenitor cells from the olfactory epithelium]

Vestn Otorinolaringol. 2019;84(1):31-35. doi: 10.17116/otorino20198401131.
[Article in Russian]

Abstract

The olfactory epithelium (OE) is an accessible source of neural stem cells and progenitor cells. The objective of the study was to compare the effectiveness of various biopsy sites to isolate and propagate neural progenitor cells from the olfactory epithelium (OE). The authors assessed OE cell count in OE in different sites of the nasal cavity and showed the possibility of isolation neurospheres from nasal biopsies. In total, 45 inpatinets were included in the study. Biopsy specimens were obtained from 30 patients undergoing septoplasty and/or turbinate surgery. Three areas of OE were biopsied: lower third section of the nasal septum (A), anterior part of the middle turbinate (B), upper third of the nasal septum (C). Immunocytochemistry and fluorescence-activated cell sorting showed that OE cells were NCAM-positive. Mean percentage of NCAM+ cells was 7.8% for A, 42.7% for B and 18.2% for C. The difference was significant between A and B (p=0.0001) and B and C (p=0.01). Therefore, the anterior part of the middle turbinate was an easily accessible and safe site to obtain neural cells. To confirm this, neurospheres were obtained in 15 patients with schizophrenia who underwent in-office endoscopy.

Обонятельный эпителий (ОЭ) является доступным источником для получения нейральных стволовых и прогениторных клеток. Цель исследования состояла в определении наиболее оптимального локуса полости носа для забора биологического материала, служащего источником прогениторных нейрональных клеток, в условиях местной анестезии. Авторы оценили концентрацию клеток ОЭ в различных участках полости носа и доказали возможность получения нейросфер из биопсийного материала. В исследование были включены 45 стационарных пациентов без нарушения обоняния. Исследование проводили в 2 этапа. У 30 пациентов во время септопластики и вазотомии брали биопсию слизистой оболочки (размер 2 мм) из трех локусов. В результате иммуноцитохимического анализа и проточной цитометрии было установлено, что на медиальной поверхности средней носовой раковины в месте ее крепления к латеральной стенке полости носа процентное содержание NCAM+ клеток составило 42,7%, в верхнем отделе перегородки носа напротив места прикрепления средней носовой раковины - 18,2%, с перегородки носа на уровне прикрепления нижней носовой раковины - 7,8% (подсчет вели на 10 000 выращенных клеток). У 15 пациентов, больных шизофренией, забор биопсийного материала производили из аналогичного локуса средней носовой раковины в условиях местной анестезии. Во всех случаях были получены нейросферы, пригодные для дальнейшего анализа (положительный ответ на маркер βIII-tubulin и MAP2).

Keywords: middle turbinate; nasal biopsy; neurosphere; olfactory epithelium; progenitor cells; schizophrenia.

MeSH terms

  • Humans
  • Nasal Cavity
  • Neural Stem Cells*
  • Neurons
  • Olfactory Mucosa*
  • Turbinates