Up to 60% of cases of equine colitis have no known cause. To improve understanding of the causes of acute colitis in horses, we hypothesized that Clostridium perfringens producing enterotoxin (CPE) and/or beta2 toxin (CPB2) are common and important causes of severe colitis in horses and/or that C. perfringens producing an as-yet-undescribed cytotoxin may also cause colitis in horses. Fecal samples from 55 horses (43 adults, 12 foals) with clinical evidence of colitis were evaluated by culture for the presence of Clostridium difficile, C. perfringens, and Salmonella. Feces were also examined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for C. difficile A/B toxins and C. perfringens alpha toxin (CPA), beta2 toxin (CPB2), and enterotoxin (CPE). Five C. perfringens isolates per sample were genotyped for the following genes: cpa, cpb, cpb2 consensus, cpb2 atypical, cpe (enterotoxin), etx (epsilon toxin), itx (iota toxin), netB (necrotic enteritis toxin B), and tpeL (large C. perfringens cytotoxin). The supernatants of these isolates were also evaluated for toxicity for an equine cell line. All fecal samples were negative for Salmonella. Clostridium perfringens and C. difficile were isolated from 40% and 5.4% of samples, respectively. All fecal samples were negative for CPE. Clostridium perfringens CPA and CPB2 toxins were detected in 14.5% and 7.2% of fecal samples, respectively, all of which were culture-positive for C. perfringens. No isolates were cpe, etx, netB, or tpeL gene-positive. Atypical cpb2 and consensus cpb2 genes were identified in 15 (13.6%) and 4 (3.6%) of 110 isolates, respectively. All equine C. perfringens isolates showed far milder cytotoxicity effects than a CPB-producing positive control, although cpb2-positive isolates were slightly but significantly more cytotoxic than negative isolates. Based on this studied population, we were unable to confirm our hypothesis that CPE and CPB2-producing C. perfringens are common in horses with colitis in Ontario and we failed to identify cytotoxic activity in vitro in the type A isolates recovered.
Jusqu’à 60 % des cas de colite équine n’ont aucune cause connue. Afin d’améliorer la compréhension des causes de colite aigüe chez les chevaux, nous émettons l’hypothèse que les Clostridium perfringens produisant l’entérotoxine (CPE) et/ou la toxine bêta-2 (CPB2) sont des causes courantes et importantes de colites sévères chez les chevaux et/ou qu’une cytotoxine non décrite encore produite par C. perfringens pourrait également causer des colites chez les chevaux. Des échantillons fécaux provenant de 55 chevaux (43 adultes, 12 poulains) avec des évidences cliniques de colite ont été évalués par culture pour la présence de Clostridium difficile, C. perfringens et Salmonella. Les fèces furent également analysées par épreuve immuno-enzymatique (ELISA) pour la présence des toxines A/B de C. difficile et les toxines alpha (CPA), bêta2 (CPB2) et l’entérotoxine (CPE) de C. perfringens. Cinq isolats de C. perfringens par échantillons ont été typés pour les gènes suivants : cpa, cpb, cpb2 consensus, cpb2 atypique, cpe (entérotoxine), etx (toxine epsilon), itx (toxine iota), netB (toxine B de l’entérite nécrotique), et tpeL (cytotoxine large de C. perfringens). Les surnageants de culture de ces isolats ont également été évalués pour leur cytotoxicité envers une lignée cellulaire équine. Tous les échantillons fécaux étaient négatifs pour la présence de Salmonella. Clostridium perfringens et C. difficile furent isolés de 40 % et 5,4 % des échantillons, respectivement. Tous les échantillons de fèces étaient négatifs pour CPE. Les toxines CPA et CPB2 furent détectées à partir de 14,5 % et 7,2 % des échantillons fécaux, respectivement, tous étant positifs pour la présence de C. perfringens en culture. Aucun des isolats n’était positif pour la présence des gènes cpe, etx, netB ou tpeL. Les gènes cpb2 atypiques et cpb2 consensus furent identifiés dans respectivement 15 (13,6 %) et 4 (3,6 %) des 110 isolats. Tous les isolats de C. perfringens équins montraient des effets cytotoxiques nettement plus légers que les témoins positifs produisant CPB, bien que les isolats possédant les gènes cpb2 étaient légèrement mais significativement plus cytotoxiques que les témoins négatifs. En fonction de la population étudiée, il nous est impossible de confirmer notre hypothèse qu’en Ontario des C. perfringens produisant CPE et CPB-2 sont courants chez les chevaux avec colites et nous n’avons pas réussi à identifier une activité cytotoxique in vitro chez les types A isolés.(Traduit par Docteur Serge Messier).